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技術(shù)文章

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怎么理解國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)光度重復(fù)性測(cè)試?

  • 更新時(shí)間2020-02-07
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   國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光源透過(guò)測(cè)試的樣品后,部分光源被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
  國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)的光度重復(fù)性(Photometric repeatability)又稱光度精密度(Photometric precision),是很重要的技術(shù)指標(biāo)。它被定義為:多次測(cè)量(一般為3-5次,有時(shí)要求7次)中,大值與小值之差。光度重復(fù)性還表征紫外可見分光光度計(jì)闡發(fā)測(cè)試結(jié)果的可靠性。一般來(lái)講,我們希望一臺(tái)儀器在同樣的條件下,對(duì)同一個(gè)樣品,不管什么人操作,其結(jié)果都在要求的誤差范疇內(nèi)。
  光度重復(fù)性的測(cè)試方法很簡(jiǎn)單。一般選定一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品(也可用使用者自己任選的樣品),由同一個(gè)操作者,進(jìn)止3-5次測(cè)試,再計(jì)算光度重復(fù)性。具體操作方法為:儀器冷態(tài)開機(jī)(即關(guān)機(jī)2h后開機(jī)),預(yù)熱半小時(shí)后,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品或使用者自選的樣品進(jìn)止光譜掃描,然后在譜圖上選擇幾個(gè)特征吸收峰,檢查在選定的測(cè)量次數(shù)內(nèi),各個(gè)峰值的大值與小值之差即為光度重復(fù)性。人們常常將光度準(zhǔn)確度和光度重復(fù)性在一次操作中完成。
  國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程和分光光度計(jì)檢定規(guī)程都規(guī)定,光度重復(fù)性要測(cè)試三次,取三次中的大小值之差作為光度重復(fù)性。

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