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首頁-技術(shù)文章-紫外分光光度計(jì)的定量分析法有哪些?

紫外分光光度計(jì)的定量分析法有哪些?

  • 更新時(shí)間2021-04-15
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   紫外分光光度計(jì)由光源、單色器、吸收池和檢測器四部分組成。分析時(shí)當(dāng)特定強(qiáng)度的入射光束(Incident beam)通過裝有均勻待測物的介質(zhì)時(shí),該光束將被部分吸收,未被吸收的光將透過(Emergent)待測物溶液以及通過散射(Scattering)、反射(Reflection),包括在液面和容器表面的反射)而損失,這種損失有時(shí)可達(dá)10%,在樣品測量時(shí)必須同時(shí)采用參比池和參比溶液扣除這些影響。當(dāng)入射光波長一定時(shí),待測溶液的吸光度與其濃度和液層厚度成正比(Lambert-Beer定律)。
  紫外分光光度計(jì)的定量分析方法包括以下幾種:
  1.絕d法
  這是紫外分光光度計(jì)諸多分析方法中使用多的一種。這是一種以比耳定律A=εbc為基礎(chǔ)的分析方法。某一物質(zhì)在一定波長下的ε值是一個(gè)常數(shù),石英比色皿的光程是已知的,也是一個(gè)常數(shù)。因此,可用紫外可見分光光度計(jì)在λmax波長處,測定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后,根據(jù)比耳定律c=A/(εb),則可求得該樣品溶液的含量或濃度。
  2.標(biāo)準(zhǔn)法
  在相同的測試條件下,分別測試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液c標(biāo)和被測試樣品溶液(樣的吸光度A標(biāo)和A樣)。然后,按公式求得樣品溶液的濃度或含量。
  3.比吸收系數(shù)法
  由于紫外線可見分光光度計(jì)的雜散光、噪聲、基線平直度和光譜帶寬以及試樣的前處理、玄年的化學(xué)平衡等所引起的。因此,一般情況下不采用這種方法。
  4.曲線法
  標(biāo)準(zhǔn)曲線法是常用的定量分析方法。首先,用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液,然后,將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長下,測試每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)的濃度值為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。后將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測得吸光度值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量。

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