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技術(shù)文章

首頁(yè)-技術(shù)文章-紫外分光光度計(jì)工作原理

紫外分光光度計(jì)工作原理

  • 更新時(shí)間2013-07-11
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  物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同。因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
  
  又因?yàn)樵S多物質(zhì)在紫外-可見(jiàn)光區(qū)有特征吸收峰,所以可用紫外分光光度法對(duì)這些物質(zhì)分別進(jìn)行測(cè)定(定量分析和定性分析)。 UV紫外光度計(jì)的紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。http://img59.chem17.com/2/20130701/635083013912080846802.jpg
  
  朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。當(dāng)入射光波長(zhǎng)一定時(shí),溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l(吸收光程)的函數(shù)。
  
  紫外分光光度法
  
  首先確定實(shí)驗(yàn)條件,并在此條件下測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸收峰以及其對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)值(同時(shí)可獲得該物質(zhì)的zui大吸收波長(zhǎng));再在選定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)(或zui大波長(zhǎng)值處),分別以(不同濃度)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標(biāo)繪出化合物溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線得到其所對(duì)應(yīng)的數(shù)學(xué)方程;接著在相同實(shí)驗(yàn)條件下配制待測(cè)溶液,測(cè)得待測(cè)溶液的吸光度,zui后用已獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求出待測(cè)溶液中所需測(cè)定的化合物的含量。


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